Hepatita C este o infecție a ficatului cauzată de virusul Flaviviridae HCV, care constă din una sau mai multe molecule de ARN. De regulă, se iau o serie de măsuri de diagnostic pentru a stabili la un pacient hepatita C. PCR este o analiză care confirmă cu acuratețe diagnosticul. Adesea concluzia este oferită de medici atunci când pacientul are deja primele semne ale bolii.
Ce este hepatita C
Afectarea ficatului de către o infecție virală transmisă prin sânge sau contact sexual se numește hepatită C în medicină. Agentul cauzal este un virus care conține ARN al agenților infecțioși necelulari din familia Flaviviridae. Infecția poate rămâne în organism mult timp fără să se arate. Prin urmare, numai atunci când un microorganism este detectat cu ajutorul unui test de sânge utilizând PCR ARN ARN, hepatita C (ca diagnostic) este considerată justificată.
Flavivirusul nu este produs în celule izolate crescute artificial. În procesul de reproducere, agentul infecțios creează modificări imunologic distincte. Acești factori împiedică organismul să dearăspunsul de protecție adecvat, iar experții întâmpină dificultăți în dezvoltarea unui vaccin eficient.
Virusul se transmite parenteral. Pentru infecție, trebuie să intre în cantități suficiente direct în fluxul sanguin.
Ce teste se fac pentru hepatita C
Patologiile virale ale ficatului sunt diagnosticate prin teste de laborator. Studiile clinice ale hepatitei C sunt efectuate prin studierea antigenelor străine și periculoși sau a compușilor proteici (anticorpi) din biomaterialul pacientului, în principal în sânge.
- Imunotest enzimatic (ELISA). Metoda se bazează pe detectarea anticorpilor lgM în sânge. Imunoglobulina este considerată cea mai mare și este un pentamer. Se manifestă prin răspunsul protector primar al limfocitelor la o substanță străină necunoscută.
- Radioimmunoassay (RIA) - determinarea cantitativă a imunoglobulinei lgM folosind un izotop radioactiv de iod marcat.
- PCR a hepatitei C - determinarea ARN viral în biomaterial (sânge). Această analiză confirmă în mod fiabil diagnosticul.
Testarea IgG nu este de încredere. Prezența sa în serul sanguin poate indica nu numai prezența unui flavivirus, ci și a unei alte infecții anterioare care are același agent patogen.
Ce determină analiza PCR
Reacția în lanț a polimerazei (PCR) se bazează pe identificarea regiunilor ADN specifice anumitor agenți patogeni în mostre de material pentru cercetare (epiteliu, sânge). Analiza face posibilă identificarea celor mai mici organisme patogene (virusuri) prin detectarea ARN-ului sau ADN-ului lor în material biologic.
Procedura de laborator pentru detectarea anticorpilor Hepatita C PCR se desfășoară în 3 etape:
- Selectați. Biomaterialul studiat este purificat de impurități și se obține ADN-ul în faza mobilă a coloanei cromatografice.
- Amplificare. Analiza se efectuează în termociclor dispozitiv-termostat. Încălzește și răcește eprubetele cu o anumită ciclicitate. Pentru un studiu, se efectuează până la 35 de cicluri. Rezultatul este un număr suficient de fragmente de ADN pentru a detecta, identifica și evalua agentul patogen.
- Electroforeză. Fragmentele rezultate sunt plasate într-un gel cu diferite saturații de agaroză și se efectuează electroforeza. Electroferograma rezultată este analizată pe un computer.
Nu este utilizat doar studiul PCR standard, ci și analiza PCR în timp real. Aceasta este diagnosticare în timp real. Metoda permite o analiză calitativă și cantitativă, ceea ce face posibilă identificarea formării și dinamicii bolii, precum și prescrierea terapiei care vizează eliminarea cauzei originii patologiei. PCR în timp real este, de asemenea, utilizată pentru a determina o cultură pură de agenți infecțioși (genotipizare).
Cum se face testul de reacție în lanț a polimerazei
Pentru diagnostic, poate fi folosit orice fluid biologic uman. Biomaterialul pentru testarea hepatitei C este de obicei sânge.
Eșantionarea pentru diagnosticare este efectuată în procedurabirou. Pentru a lua sânge, utilizați eprubete de unică folosință cu o substanță care inhibă coagularea sângelui. Activitățile axate pe prevenirea răspândirii agenților infecțioși ajută la evitarea pătrunderii altor tulpini de microorganisme din exterior.
Sânge pentru PCR a hepatitei C se ia dimineața pe stomacul gol. Proba se trimite imediat la laborator. Este permisă depozitarea biomaterialului la o temperatură de +4 până la +8 grade Celsius. Containerele sunt etichetate și prevăzute cu instrucțiuni. Rezultatele testelor sunt disponibile în 48 de ore, uneori mai devreme.
Tipuri de PCR
Gama de aplicare a reacției în lanț a polimerazei este destul de largă. Infecțioștii determină prin PCR hepatita B, bolile transmise de insectele suge de sânge, SIDA, tuberculoza. În oncologie, folosind această metodă, celulele tumorale sunt detectate într-un stadiu incipient.
Există aproximativ paisprezece tipuri de analize. Utilizarea unuia sau a altuia depinde de amploarea și rezultatele finale ale analizelor. Unele tipuri de PCR sunt indispensabile atunci când rezultatul este necesar în 20 de minute.
Pentru a diagnostica hepatita C, se folosesc 3 tipuri de reacție în lanț a polimerazei:
- Evaluarea calitativă poate fi fie pozitivă, indicând prezența unei infecții în organism, fie negativă, indicând absența unui flavivirus.
- PCR în timp real (analiza cantitativă) - determină ARN-ul cantitativ al agentului patogen în UI/ml.
- Genotiparea este o analiză care dezvăluie tipul (genotipul) virusului.
Pentru a identifica și determina cu precizie boala, urmat detoate cele trei tipuri de studii sunt folosite pentru a prescrie terapia optimă.
Analiza calitativă a reacției în lanț a polimerazei
O analiză este obligatorie pentru toți cei care au un ELISA care a detectat anticorpi împotriva HCV. PCR calitativ pentru hepatita C este testul standard de susceptibilitate. Metoda vizează doar detectarea, nu se efectuează numărarea sau izolarea altor substanțe.
Pentru detectarea anticorpilor, sunt utilizate sisteme speciale de testare cu un prag de sensibilitate de cel puțin 50 UI/ml. Dacă sunt detectați anticorpi, sunt prescrise alte teste de clarificare. Dacă rezultatul este negativ, nu se vor efectua alte teste.
În unele cazuri, un rezultat fals negativ se poate datora personalului incompetent al laboratorului sau reactivilor de proastă calitate. Pentru asigurare, este mai bine să reluați analiza în altă parte.
PCR cantitativ
Metoda este folosită pentru a studia direct numărul de flavivirus într-un ciclu de reacție. Pentru măsurarea precisă, se folosesc fragmente de ADN utilizate pentru hibridizare sau primeri marcați fluorescent. Există o opțiune de detectare economică folosind colorantul verde SYBL. Colorantul este înțepat într-un mic șanț din ADN și devine albastru atunci când este iradiat cu un laser.
Concentrația este determinată de aparatul-amplificator în echivalent digital. Valorile pot varia ușor între laboratoare și, prin urmare, ar trebui comparate cu valorile de referință.
PCR cantitativhepatita C ajută la alegerea dozei optime de medicamente și la determinarea duratei terapiei. Frecvența studiului depinde de stadiul bolii, de tipul de genotip și de cursul de tratament prescris.
Determinarea genotipului
Virusul hepatitei C are o structura genetică variabilă. Numeroase modificări fac imposibilă crearea unui vaccin și, de asemenea, complică terapia. Au fost identificate și înregistrate un total de 11 genotipuri și 100 de subtipuri. În țările fostei URSS, la persoanele infectate cu hepatita C, PCR detectează în principal genotipurile 1b și 3.
În prezența oricăruia dintre genotipuri, ciroza sau cancerul hepatic pot zbuciuma. De aceea este atât de important să detectați virusul la timp.
Pentru unii pacienți, anumite medicamente concepute pentru a combate HCV sunt toxice. Genotiparea vă permite să determinați tipul de proteină și să prescrieți un medicament eficient.
În rezultatele testelor de dactilografiere există un număr cu o literă latină minusculă care indică genotipul virusului. Dacă VHC este detectat, dar nu este introdus, aceasta înseamnă că persoana are un genotip care nu este tipic pentru o anumită zonă geografică.
Rezultatele analizei
Doctorul se ocupă de descifrarea rezultatelor. Doar datele din mai multe studii (împreună cu anamneză și examinare) pot oferi o imagine generală reală a istoricului medical.
- La o persoană sănătoasă, un test pentru o reacție calitativă în biomaterial nu detectează nimic. Dacă este indicată valoarea „detectată”, infecția este confirmată, iar pacientulnecesită un diagnostic suplimentar urmat de tratament.
- Determinarea numărului de agenți infecțioși face posibilă evaluarea încărcăturii virale asupra organismului. În mod normal, PCR cantitativ pentru hepatita C nu detectează agentul patogen. Un indicator de până la 810^5 este considerat o sarcină scăzută și, cu o terapie adecvată, garantează un rezultat favorabil. Valorile mai mari necesită o examinare aprofundată și o determinare a terapiei pe termen lung, pentru al cărui rezultat pozitiv nimeni nu poate garanta.
- Rezultatele pozitive de genotipizare indică genotipul recunoscut. Un rezultat negativ indică fie absența unui flavivirus, fie prezența unui genotip care nu este tipic pentru această regiune.
Ce indică un test PCR pozitiv
Orice boală gravă necesită un diagnostic cuprinzător. Un PCR pozitiv pentru hepatita C confirmă diagnosticul, dar predicțiile pot fi făcute numai după studii suplimentare de laborator și instrumentale.
Detectarea unui virus nu oferă o imagine completă a patologiei. Este necesar să se identifice tipul și natura sa, să se determine modul în care afectează ficatul și alte organe. Detectarea precoce a VHC are adesea un rezultat terapeutic favorabil.
PCR negativ cu ELISA pozitiv
La observarea simptomelor caracteristice leziunilor hepatice, există o probabilitate mare ca infecția să fi pătruns deja în organism. Prin urmare, ar trebui să contactați un hepatolog sau un specialist în boli infecțioase. În timpul interviurilor, specialistul va colecta o anamneză și va prescrie examinarea necesară.
Dacărezultatele studiilor privind hepatita C PCR sunt negative, iar imunotestul enzimatic este pozitiv, ceea ce indică prezența anticorpilor împotriva flavivirusului în sânge. Acest lucru se întâmplă de obicei atunci când infecția intră în organism într-o cantitate mică, astfel încât sistemul imunitar a făcut față singur. Dar astfel de persoane sunt încă considerate infectate și trebuie să fie examinate la fiecare 6 luni. Dacă, cu astfel de rezultate, unei persoane i se refuză un examen medical gratuit, este mai bine să faceți un PCR contra cost pentru a menține sănătatea, iar dacă rezultatele sunt pozitive, contactați un specialist pentru diagnostic și tratament.
Avantajele și dezavantajele metodei
La stabilirea diagnosticului de hepatită C, PCR are mai multe avantaje:
- Detecția precoce a agentului patogen.
- Definiția exactă a virusului.
- Eficiența diagnosticului.
- Rata minimă de eroare.
- Sensibilitate ridicată.
Dezavantajele metodei:
- Costul ridicat al analizei. Testul necesită echipamente scumpe, reactivi și personal medical de în altă calificare. Toate împreună reprezintă o sumă considerabilă.
- Cerințe stricte pentru transportul de biomaterial.
Tratamentul inflamației ficatului
Analiza PCR pentru virusul hepatitei C este considerată fundamentală pentru diagnostic, dar nu definitivă. Pentru ca terapia să fie eficientă, sunt necesare o serie de studii de laborator și instrumentale suplimentare. După ce a trecut toatemăsuri de diagnostic pe care medicul prescrie tratamentul:
- Dieta 5 este prescrisă.
- Alcoolul este complet exclus.
- Recepție comună de interferon și ribavirină timp de 25 de zile.
- Cursuri de hepaprotectori „Essentiale”, „Karsil”, „Phosphogliv”.
- În cazuri speciale, se folosește plasmafereza discretă.
Medicamentele prescrise de un hepatolog sunt utilizate în mod regulat, fără modificarea dozei. Durata de administrare a medicamentelor este determinată de medic după trecerea testelor de control. După finalizarea cursului de terapie, trebuie să vizitați medicul la fiecare șase luni.
PCR-diagnostica permite identificarea agentului cauzal al hepatitei C într-un stadiu incipient. Acest lucru contribuie la eficacitatea terapiei și la prevenirea tranziției bolii în forme atât de periculoase precum ciroza și carcinomul hepatocelular.
