Conform statisticilor OMS, în ultimii 40 de ani, 25 de milioane de oameni au murit din cauza SIDA. Daunele de la această infecție sunt enorme. Cei mai mulți dintre cei infectați s-au dovedit a fi în Africa, de unde a provenit această infecție. Cu HIV, diagnosticul bolii devine deosebit de relevant. Adevărat, încă nu există remedii pentru HIV, dar tratamentul precoce poate prelungi viața pacientului și poate îmbunătăți calitatea acesteia.
Diagnosticarea infecției cu HIV
Infecția cu HIV este determinată în diferite etape prin următoarele metode:
- ELISA - imunotest enzimatic.
- Western blot.
- PCR - reacție în lanț a polimerazei.
- Teste rapide.
Metoda PCR a fost dezvoltată de biochimistul american Kary Mullis, care a primit Premiul Nobel pentru aceasta în 1983. Astăzi, această metodă în medicină în diagnosticarea tuturor infecțiilor este considerată cea mai importantă datorită acurateței și conținutului de informații. HIV nu face excepție în acest sens.
Esența analizei
Orice celulă vie conține ARN și ADN. Acești acizi nucleici sunt capabili de auto-copiere și auto-replicare. Pentru fiecare infecție, fragmentele de ADN sunt unice. LAîn fluidele biologice circulă aceste fragmente de acizi nucleici. Sunt capturați și recunoscuți de echipamente speciale - reactorul. Aceasta este baza metodei. Asistentul de laborator numără aceste fragmente. Retrovirusul HIV este monitorizat pentru ARN. Chiar și cu copii unice ale particulelor virale, PCR le poate detecta și număra.
Sângele venos este cel mai des folosit ca fluid de testare. Componentele speciale ale metodei se leagă de particulele de virus și le fac detectabile, deoarece fragmentele găsite sunt multiplicate.
În cazul HIV, rezultatul prezenței virusului poate fi obținut cu mult înainte de apariția clinicii. Prin urmare, datorită sensibilității sale ridicate, PCR are o valoare diagnostică atât de mare. Un mare plus al PCR este versatilitatea metodei. Perioada de incubație a infecției pentru PCR nu este un obstacol.
Costul cercetării
Metoda PCR este destul de costisitoare. Acesta este unul dintre marile sale dezavantaje. Necesită echipament de ultimă generație și asistent de laborator în alt calificat. Având în vedere cele de mai sus, diagnosticele PCR nu sunt efectuate în localități mici. Puteți fi testat numai în clinici mari specializate.
Costul testării ADN HIV în clinicile din Moscova începe de la 2.800 de ruble, încărcarea virală (ARN viral în plasmă) este determinată prin PCR - de la 8.800 de ruble, iar rezistența HIV la inhibitorii de protează - de la 16.500 de ruble. După cum puteți vedea, prețurile sunt destul de mari. PCR se poate face gratuit în clinicile publice conform politicii MHI. Important,ca procedura se poate face anonim. În registru, pacientul primește un număr prin care poate afla rezultatul. În centrele medicale moderne există conturi personale ale clienților unde vor fi introduse aceste date.
Obiective de cercetare
Diagnosticarea PCR pentru HIV este prescrisă în astfel de cazuri:
- Detectarea infecției la un copil născut dintr-o mamă bolnavă sau purtător pentru a determina infecția intrauterină.
- Dacă ELISA a dat rezultate îndoielnice (PCR pentru HIV ajută în acest caz la stabilirea unui diagnostic final).
- Pentru a detecta conținutul cantitativ al virusului în organism.
- Cu un imunblot pozitiv, se completează reciproc cu PCR.
- Testarea donatorilor.
- Pentru diagnosticul precoce al HIV.
- Pentru a determina eficacitatea și rezistența la ART.
Avantajul acestei analize este că PCR pentru HIV poate fi efectuată chiar și pentru copiii sub un an.
Cercetarea este adesea efectuată nu pentru diagnosticul primar, ci deja în proces de tratament. Diagnosticele primare sunt studii serologice (acestea determină nivelul de anticorpi împotriva HIV). Dacă se repetă un rezultat fals pozitiv, acesta poate fi cu o încărcătură virală scăzută.
PCR diagnostichează HIV atunci când nu există încă anticorpi împotriva acestuia. Metoda ELISA în acest caz nu va da un răspuns.
Și PCR pentru HIV va fi deja pozitiv. Dar simptomele acestei perioade de HIV sunt nespecifice. Pacientul este tratat mai întâi pentru o lungă perioadă de timp și fără succes pentru ARVI de către un medic generalist. Trebuie avut în vedere faptul că diagnosticul HIV se bazează numai pePCR nu este pus, este necesar să treacă alte teste cuprinzătoare. Metoda PCR este mai des auxiliară pentru cazurile dificile.
Pregătirea pentru analiză
Înainte de a lua PCR pentru HIV, cu 2 zile înainte de test, nu trebuie să consumați alimente grase, alcool. De asemenea, este mai bine să nu te încordezi psihic și fizic. Dacă pacientului i se prescrie un curs de imunostimulare, acesta este oprit cu 2 săptămâni înainte de analiză.
Sângele se ia cel mai bine dimineața. Se pot examina și alte fluide biologice ale corpului (sperma, secreția vaginală), dar sângele este cel mai bun material. Saliva, transpirația, urina și lacrimile nu sunt folosite, deoarece conținutul de virus în ele este minim.
Plusuri de PCR pentru HIV
Avantajele metodei sunt probabilitatea extrem de scăzută a unui rezultat fals pozitiv, universalitatea reacției pentru orice fluide biologice ale corpului. Analiza are o gamă largă:
- O singură prelevare de sânge poate fi utilizată pentru a detecta diferite infecții.
- Tehnica este urgentă, rezultatul este gata chiar a doua zi.
- Încrederea este între 85 și 98%.
- Prezența HIV poate fi determinată la 10-14 zile după infectare (în acest moment nu există anticorpi).
- Fără limită de vârstă, poate fi efectuat imediat de la naștere.
Dezavantaje ale metodei
Dezavantajele PCR sunt următoarele:
- Costul analizei.
- Necesită echipament medical sofisticat.
- Necesită asistent de laborator cu în altă calificare și medic,analiza utilizatorului.
- Reacția este foarte sensibilă, deci eroarea poate fi de 20%.
- Poate duce la un rezultat fals pozitiv dacă pacientul are procese autoimune, oncologie, infecții cronice.
- Este necesară curățenia specială a localului laboratorului, deoarece virusul poate intra în analiză din aer. Atunci rezultatul va fi greșit.
Pentru laboratoarele care efectuează PCR, pentru îmbunătățirea calității diagnosticelor, au fost dezvoltate măsuri speciale stricte conform sistemului SanPiN de control intern. În plus, trebuie respectate toate regulile de lucru cu această tehnică:
- Este necesar să urmați cu strictețe informațiile de pe eprubete.
- Înainte de recoltarea probelor de sânge, priviți din nou și asigurați-vă că analiza este programată.
- Asistenta trebuie să eticheteze tuburile corect.
- Asistentul de laborator trebuie să efectueze corect toate manipulările cu biomaterialul pentru a preveni contaminarea încrucișată.
- Sistemul de testare trebuie să fie de o calitate excelentă.
Numai dacă toate aceste condiții sunt îndeplinite, eroarea din răspuns poate fi de numai aproximativ 2% din episoade.
Durata analizei
Mulți sunt interesați de cât timp va fi gata PCR pentru HIV. Diagnosticul nu durează mai mult de 8 ore. Pacientul poate primi un răspuns chiar a doua zi. Testarea rapidă se efectuează în 2 ore.
Fiabilitatea PCR
În ciuda numeroaselor sale avantaje, PCR nu este considerată o metodă de diagnostic ideală. El este contactat în caznecesitatea de a obține teste de screening pentru prezența HIV în organism.
Când se ia sânge pentru analiză?
Cât timp trebuie să luați PCR pentru HIV? Un rezultat fiabil poate fi obținut deja atunci când luați sânge la 4-4 zile după presupusa infecție. După 2 săptămâni, fiabilitatea pentru HIV va fi de 98%, iar cu o perioadă de 5 zile - 80%. Prezența unui rezultat negativ în PCR pentru HIV va fi de încredere, dar pentru un rezultat absolut exact, se efectuează și ELISA.
Analiza ELISA va fi eficientă numai dacă există anticorpi împotriva virusului, acest timp poate dura de la 1-3 luni la șase luni. Deoarece ELISA oferă o probabilitate mai mare (98% -99,9%), PCR nu poate fi numit un test de confirmare 100% pentru prezența infecției cu HIV. Dar, pe de altă parte, aceasta este singura tehnică în care nu trebuie să așteptați apariția anticorpilor.
Cu HIV, PCR poate oferi informații despre eficacitatea TAR, stadiul bolii HIV și numărul de VN (o evaluare cantitativă a prezenței HIV în organism). Aceasta va vorbi despre gravitatea și amploarea schimbării.
Testarea PCR pentru HIV este, de asemenea, necesară dacă există anticorpi în sânge, dar prezența acestora nu indică fiabilitatea infecției cu HIV din punct de vedere clinic.
Sunt testați nu numai pentru infecție și sex ocazional. Alte ocazii:
- Planificarea sarcinii.
- Operațiune viitoare.
- Sex ocazional.
- Unele profesii necesită acest test pentru admiterea la muncă (profesori, medici și alt personal medical).
- Prizonieri.
- pacienți cu TB.
- Angajați ai Ministerului Situațiilor de Urgență și ai poliției.
- Întors din vacanță din țări exotice (dacă doriți să vă asigurați că nu există nicio infecție).
- Prostituate.
- Studenți străini.
- droguri.
De asemenea, anumite simptome la un pacient pot forța un test HIV:
- Scădere bruscă în greutate.
- Diaree care durează mai mult de 3 săptămâni
- Temperatura ridicată nerezonabilă pentru o lungă perioadă de timp.
- ganglioni limfatici umflați.
- Cauza inexplicabilă a pneumoniei, candidozei etc.
Descifrarea analizei este prerogativa medicului curant, nu a asistentului de laborator.
PCR sau ELISA, care este mai bine?
Când diagnosticul PCR al ARN-ului virusului HIV este detectat atât calitativ, cât și cantitativ. Această analiză identifică în mod clar un anumit agent patogen, chiar dacă există mai mulți agenți patogeni cu reacție încrucișată. Materialul biologic poate fi folosit chiar și sub formă uscată. Dezavantajul este sensibilitatea ridicată a PCR, când un rezultat fals pozitiv poate fi dat de prezența chiar și a unei cantități mici de ADN străin pe instrumente sau o eprubetă.
Sarcina și posibilitatea ELISA este de a determina prezența anticorpilor la un retrovirus. Deși acuratețea sa este de 99%, nu este aplicabilă în stadiile incipiente.
Testare calitativă pentru HIV
PCR de în altă calitate pentru HIV determină prezența virusului în organism. Rezultatele în acest caz vor arăta astfel: pozitiv, fals pozitiv, negativ. Dar acest studiu nu va oferi informații despre cantitatea de retrovirus. O astfel de analiză calitativănepotrivit atunci când infecția cu HIV a fost deja detectată în organism prin alte mijloace.
Este imposibil de controlat eficacitatea tratamentului cu PCR de în altă calitate.
cuantificare HIV
Efectuat numai de persoane infectate cu HIV pentru a număra numărul de copii ale virusului ARN dintr-un produs biologic.
Scopul unui astfel de studiu este de a monitoriza tratamentul în curs și de a identifica rezistența virusului la acesta. Terapia antivirală în astfel de calcule nu este prescrisă orbește de un medic, așa că va fi mai eficientă. PCR cantitativ pentru infecția cu HIV se face mult mai des. Această analiză este afișată ca o copie/ml de sânge.
Ce rezultate pot fi date:
- ARN viral este absent sau este foarte mic (aproximativ 20 de copii/ml). Nu există certitudinea diagnosticului.
- De la 20 - la 10 copii de gradul 6 / ml - diagnosticul este de încredere.
- Peste 106 de copii/ml - VN mare.
Laboratoarele pot efectua teste PCR în timp real pentru HIV. Aceasta presupune observarea și evaluarea numerică a acumulării de produse PCR cu înregistrarea automată a rezultatelor.
