Ce este cercetarea bacteriologică? După ce schemă se realizează? Ce se înțelege prin siguranță în acest caz? Care sunt obiectivele și etapele cercetării bacteriologice?
Informații generale
Examinarea bacteriologică este un proces științific în care bacteriile sunt identificate și sunt studiate proprietățile acestora în vederea punerii unui diagnostic microbiologic. De mare importanță aici este determinarea tipului sau speciei microorganismului rezultat (este implicată cultura pură). Aceasta este însoțită de studiul proprietăților biochimice și fiziologice ale organismelor, precum și a tendinței de formare a toxinelor. În aceste scopuri se folosesc reacții de precipitare și aglutinare. De asemenea, se practică pentru infectarea animalelor de laborator cu detectarea ulterioară a modificărilor patologice.
Lucrul cu materialul de testare
Algoritmul de studiu bacteriologic prevede respectarea strictă a instrucțiunilor speciale. Astfel, materialul de testat trebuie colectat în vase sterile în condiții aseptice. De asemenea, este necesar să aveți grijăpentru a asigura livrarea la laborator cât mai curând posibil. Depozitarea la rece a probelor este de dorit. Tehnica cercetării bacteriologice prevede multe situații posibile. Astfel, tipul de obiect, proprietățile microorganismului și natura bolii fac adesea necesară elaborarea instrucțiunilor individuale de lucru. În lucrare sunt utilizate un număr mare de metode diferite. Una dintre cele mai frecvente este bacterioscopia. Dar dacă bacteriile nu sunt fixate, atunci se folosește o picătură zdrobită sau atârnată. Trebuie remarcat faptul că ultimele două opțiuni se caracterizează printr-un nivel crescut de contagiozitate.
Bacterioscopie
În acest caz, sunt folosite lovituri. Pentru a le crea, trebuie să distribuiți o picătură de lichid care este studiat pe suprafața unei lame de sticlă. Zates ar trebui să-l usuce. Acest lucru se face adesea prin mutarea medicamentului printr-o flacără obținută de la un arzător cu gaz. Deși compușii de fixare pot fi utilizați ca alternativă. Pentru a indica faptul că au fost efectuate acțiuni pregătitoare cu acest preparat, acesta este colorat. Scopul unei astfel de manipulări este acuratețea, care este foarte importantă atunci când se efectuează examinarea microscopică și bacteriologică. La urma urmei, dacă reutilizați medicamentul în alt scop, obțineți terci, cu care va fi foarte dificil să lucrați eficient.
De ce este atât de populară bacterioscopia
Nu în ultimul rând datorită disponibilității acestei metode. Dacă se efectuează un studiu bacteriologic al unui preparat proaspăt, atunci pentru a determina agentul patogenpot fi utilizate reacții microchimice sau colorarea selectivă a diferitelor părți structurale ale microorganismului. Care este mai bun? Un rezultat mai precis se poate obține atunci când se lucrează cu un preparat colorat. În acest caz, materialul de testat este aplicat pe o lamă de sticlă pregătită în prealabil. Și asigurați-vă că subțireți (și dacă este posibil chiar) stratul. După aceea, trebuie să așteptați până când medicamentul se usucă în aer. Microorganismele sunt apoi fixate folosind una dintre metodele convenționale. După aceea, preparatul răcit este supus colorării cu o vopsea diferențială sau simplă. Pentru aceasta se pot folosi preparate uscate si native. După aceea, rămâne să direcționați razele ultraviolete sau albastre scurte către locul de acumulare a organismelor, ceea ce face ca întregul microbi sau anumite părți ale corpului să strălucească.
Aplicarea practică a bacterioscopiei
Este folosit pentru a diagnostica o serie de boli infecțioase. Cele mai faimoase dintre acestea sunt tuberculoza, gonoreea și febra recurentă. În plus, ei recurg la cercetare pentru a studia întregul complex de microfloră al unui organ sau al unui produs. Dar criticii atrag adesea atenția asupra nefiabilității și inexactității relative a acestei metode.
Culturi și subculturi de culturi bacteriene
Efectuați-le folosind o pipetă Pasteur. Efectuarea examenului bacteriologic și citologic este adesea dificil de efectuat fără inoculare și subcultură în timpul fluxului de lucru. Când lucrați cu o pipetă Pasteur, vârful acesteiase rupe cu penseta. Instrumentul în sine este apoi transportat prin flacăra arzătorului și apoi lăsat să se răcească. Apropo, atât mediile nutritive lichide, cât și solide pot fi folosite pentru însămânțare. Alegerea este influențată de obiectivele urmărite ale cercetării bacteriologice. În același timp, este necesar să se respecte algoritmul de lucru și măsurile de siguranță. Deci, atunci când lucrați cu un mediu nutritiv lichid, este necesar să vă asigurați că acesta nu se varsă și nu udă marginile dopului și eprubetelor. Când studiul este efectuat cu material solid, un ac special este adesea folosit pentru a intra în cultură. Când se efectuează însămânțarea și reînsămânțarea, acestea trebuie efectuate lângă flacăra unui arzător cu gaz. Pentru puritatea experimentului, eprubeta nu trebuie să rămână deschisă mult timp. Cât despre instrumentul cu cultură: ar trebui să vă asigurați că nu atinge nimic. De asemenea, tehnica cercetării bacteriologice prevede arderea marginilor eprubetei înainte de a o închide. Un produs finit trebuie semnat imediat după producție pentru a evita confuziile viitoare.
Eficiența semănatului
Se crede că această metodă permite obținerea de date mai precise și mai sigure în timpul diagnosticului bacteriologic decât bacterioscopia considerată anterior. În acest caz, algoritmul acțiunilor este următorul:
- Inițial, o cultură pură este unsă pe suprafața mediului nutritiv, care este turnată într-o cutie Petri.
- Semănatul inițial trebuie făcut în condiții favorabile specieimicroorganisme.
- După o zi sau două, în prezența unui mediu optim, toate coloniile potrivite se mută acolo unde se pot dezvolta la maximum. Astfel, îi eliberează de microflora străină.
Rezultatul final este o cultură de bacterii omogene care pot fi identificate.
Culturi pure
Dar cum sunt făcute? Pentru aceasta se folosesc metode biologice și mecanice. În primul caz, un rol important îl joacă mediile nutritive, unde există condiții necesare favorabile dezvoltării unei anumite culturi. O abordare poate fi utilizată și atunci când animalele de laborator susceptibile la un anumit tip de bacterii se infectează. Metodele mecanice se bazează pe utilizarea unui instrument steril, cu ajutorul căruia cultura este plasată într-un mediu nutritiv situat în prima, a doua și a treia cutie Petri. Apoi, este necesar să așteptați până când coloniile individuale cresc, iar o cultură pură va ieși deja în evidență dintre ele. Bacteriile pot fi cultivate și în termostate speciale, unde temperatura este menținută la un anumit nivel (de obicei aproximativ 37 de grade). În acest caz, procesul continuă timp de aproximativ o zi. Dar, în funcție de tipul de microorganisme, se pot stabili și alți termeni. De asemenea, importantă este prezența concentrației necesare de oxigen. Pentru a face acest lucru, utilizați diferite metode de aerare. Până acum, am vorbit despre situație în ansamblu și în general, dar acum să ne concentrăm atenția asupra care este schema cercetării bacteriologice.
Practică
Un set de metode este adesea folosit pentru a detecta microorganismele patogene în corpul unui pacient sau al unui potențial purtător. Materialele și metodele utilizate depind de scopurile analizei, precum și de condițiile mediului în care se desfășoară munca. În practică, cel mai adesea bacteriile sunt detectate prin hemoculturi prelevate de la o persoană sau un animal. Dacă leziunile locale sunt bine definite, agenții patogeni pot fi căutați în zonele cu probleme. Acest lucru este tipic pentru afecțiuni precum dizenteria, gonoreea, difteria și multe altele asemenea. În cazuri deosebit de severe, acest proces este împărțit în etape separate ale examenului bacteriologic (care este tipic pentru febra tifoidă). Fiecare dintre ele folosește propriile metode, care au ca scop găsirea cauzei infecției. Să aruncăm o privire mai atentă asupra situației cu febra tifoidă. În prima săptămână de boală, cea mai fiabilă modalitate de a diagnostica boala sunt hemoculturile. Pe al doilea, un studiu serologic este considerat a fi astfel. În a treia săptămână, scaunele sunt examinate. Se consideră că ultima metodă este verificarea convalescenților.
Identificarea microorganismelor
Începe cu procesul de vopsire. Apoi se uită la modul în care bacteria poate descompune carbohidrații, aminoacizii și așa mai departe. În plus, acest proces poate fi completat de studiul altor proprietăți pe care le posedă fiecare gen sau specie individuală de microorganisme. De exemplu, ar trebui date posibilitățile de dizolvare a eritrocitelor diferitelor animale, efectul asupra coagulării plasmatice și dizolvarea cheagurilor.fibrină și așa mai departe. Toate acestea sunt trăsăturile diferențiale ale reprezentanților individuali ai microlumii. De asemenea, identificarea serologică poate fi folosită pentru recunoașterea finală (dar aceasta se referă de obicei la bacterii patogene care aparțin familiei intestinale).
Concluzie
De remarcat că o serie de microorganisme nu pot fi identificate prin metodele descrise în articol. În acest caz, practica de infectare a animalelor de laborator este utilizată pe scară largă. Calculul se face pe faptul că va apărea toxigenitate sau patogenitate caracteristică, care nu se observă în condiții artificiale. Infecția poate fi folosită și ca metodă de acumulare a microbilor patogeni. Și deja când se compară caracteristicile culturii studiate, găsite în procesul de studiu a proprietăților biologice, morfologice, serologice și biochimice, putem spune că se știe cu ce fel de microbi avem de-a face. Identificarea înseamnă o indicație a genului, speciei și tipului de bacterie. Dacă microorganismul studiat se abate în anumite proprietăți de la caracteristica sa tipică, atunci acest lucru trebuie indicat. O serie de experți consideră că în astfel de cazuri va fi utilă reidentificarea prin duplicare a tuturor metodelor și tehnicilor utilizate. Uneori, cercetarea poate fi dusă la nivelul următor, ceea ce necesită o abordare mai serioasă (și mai costisitoare). Dacă s-au obținut rezultate negative, atunci acest lucru indică faptul că preparatulmicroorganismele erau absente sau nu erau viabile. Dar, pentru acuratețea cercetării, dacă sunt suspectați un număr de purtători de bacil (dizenterie, difterie, febră tifoidă), în astfel de cazuri sunt prezentate verificări repetate. Acest lucru este necesar pentru ca specialiștii să aibă o idee exactă cu privire la ceea ce trebuie să se ocupe.
